免疫调节抗癌治疗抗体近年来批准的免疫调节抗癌治疗抗体，例如抗CTLA-4和抗PD-1，这已经驱动了对提供药物功能机械理解的方法的生长感兴趣。开发新的单声道和具有免疫调节效果的组合疗法需要更强大的免疫胞间型技术能够进行深度细胞表征。流动细胞仪的功能测定对于阐明药物的机制至关重要。虽然标准流式细胞术可以鉴定样品中的免疫子集及其相对丰度，但功能测定允许表征这些群体的生物学意义，包括抑制性能力或靶人群的活化状态。
功能性测定通常涉及用药物，抗体和/或细胞因子的细胞进行刺激，然后染色标记以量化生物反应。Covance已经验证了允许有效表征免疫子集的功能测定，包括：
- 混合淋巴细胞反应（MLRS）：来自两只小鼠的两个同种异体菌株的脾细胞，刺激群和响应者群体是共同培养的。用CFSE染色测量响应者群的增殖，这是一种胺反应性染料，允许跟踪多达七个循环的细胞分裂。来自肿瘤 - 幼稚刺激动物的脾细胞引发增殖，而轴承某种类型肿瘤的动物的脾细胞将抑制增殖。该测定可用于测量药物治疗引起的免疫抑制的改变。下面的数据代表来自A20-肿瘤小鼠的穗细胞作为刺激细胞时，MLR中增殖的抑制。
- NK细胞刺激：脾细胞或解离肿瘤用IL-12和IL-18培养，以防止产生的细胞因子排泄。量化包括IFN-γ的标记的表达以在总NK细胞群内鉴定活化的NK细胞。
- B细胞刺激：用IgM培养脾细胞或解离的肿瘤，并定量包含CD69的标记物的表达以鉴定总B细胞群内的活化的B细胞。
- T细胞刺激：CFSE染色后，可以用IL-2，抗CD28和抗CD3E或抗CD3E或感兴趣的药物培养脾细胞。在刺激后，可以测量增殖和存活率的微分率。以下数据代表培养的增殖与（红色）和没有（蓝色）抗体刺激。
