荧光素酶标记细胞系:肿瘤研究的宝贵工具

作者:Manali Dimri博士，科学发展科学家
日期: 2021年7月

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荧光素酶是一种氧化酶，它在生物体内底物(d -荧光素)存在时发光，这一过程被称为生物发光。最常见的荧光酶基因来自发光酶家族，称为萤火虫荧光酶^{1， 2}.

在临床yaboapp体育官网前研究中，小动物在活的有机体内成像在可视化生理过程、疾病进展和治疗发展中起着至关重要的作用。荧光素酶（luc）激活的细胞系通过生物发光成像（BLI）提供了一种简单、高通量和稳健的方法，用于定量评估受试动物的肿瘤负担和肿瘤对治疗的反应^{1， 2}.点击这里了解更多关于BLI的信息

BLI系统的灵敏度和准确性优于传统方法，如:

(1)无创实时全身在活的有机体内肿瘤监测和成像

(2)在同一动物中持续评估肿瘤进展和对治疗的反应

(3)转移的评估

（4）减少动物牺牲的需要

为什么要开发Labcorp药物（以前是Covance实验室）？

Covance于2003年成为第一个提供BLI的合同研究组织(CRO)，在过去的18年里，我们在光学成像领域积累了丰富的经验。我们提供大量荧光素酶激活的细胞系，超过80种独特的血液恶性肿瘤细胞系(表1)。我们有专门的专家团队，为您设计最佳的肿瘤学研究，并确保研究顺利执行。我们的科学家能够熟练地设计我们的内部细胞系或您感兴趣的细胞系，以及定制表达BLI检测荧光素酶的载体。细胞系的完整列表

LabCorp Drug Development(原Covance Laboratories)与Dana Farber Cancer Institute和其他组织签订了许可协议，提供了更多的特性，在活的有机体内验证荧光素酶表达的肿瘤细胞系。

我们的荧光素酶表达的肿瘤细胞系

·荧光素酶表达稳定

荧光蛋白(mCherry)与Luc 2基因

·信号强度与细胞数的定量相关性

·灵敏度高，信噪比低

·人、小鼠和大鼠多种肿瘤细胞系的可用性

·适合体外也为在活的有机体内化验

我们还提供了一种在luc细胞中进行细胞转导的替代方法，即细胞电穿孔，允许客户选择定制的载体而不是慢病毒载体。

与BLI相关的服务包括:

它是如何工作的?

通常，利用慢病毒系统进行转导，使癌细胞表达萤火虫荧光素酶基因和嘌呤霉素耐药基因(图1A)。除了Luc 2基因外，该结构还有一个荧光蛋白编码基因(mCherry)，可以检测不同组织中的肿瘤细胞。细胞在嘌呤霉素存在下培养，选择插入编码萤火虫荧光素酶的慢病毒载体的细胞(图1B)。从荧光素酶激活的细胞产生光输出(图1C(ii))，并使用IVIS®体内成像系统测量生物发光(图1C(i));然后将含有荧光素的细胞移植到小鼠体内形成肿瘤。在注射d -荧光素(底物)后，荧光素酶将催化该底物产生光发射，用IVIS®(PerkinElmer, Waltham, MA)检测(图1D(i))，并使用PerkinElmer 's Living Image软件分析感兴趣的区域(图1D(ii))。

图1：一代表达荧光素酶的肿瘤细胞系的表达在活的有机体内生物荧光成像。a .用慢病毒载体转导肿瘤细胞系。B.利用选择标记筛选和扩增转导的肿瘤细胞系。C. (i) Raji细胞经慢病毒载体转导，添加d -荧光素底物证实荧光素酶表达。(ii)使用Perkin Elmer's Living Image软件对荧光素酶的生物发光进行量化，并绘制细胞数量与总通量的比值(p/s=光子/秒)。D. (i)使用BLI监测肿瘤负荷。使用IVIS®在不同时间点进行发光成像。(ii)使用Perkin Elmer's Living Image软件定量荧光素酶生物发光。

组织型	细胞系	物种
脑	D54-Luc	人类
	Gli36-DsRed-R-Luc(获救)	人类
	LN-827（pMMP卢克尼奥）	人类
	u - 251 - luc妇幼保健雪茄烟	人类
	U-87毫克卢克	人类
	GL261-Luc2	老鼠
	9 l-luc	老鼠
膀胱	T24吕克近地天体	人类
	MB49 Luc mCh Puro	老鼠
冒号	科罗拉多州205 - luc # 2	人类
	hct - 116卢克	人类
	HT-29-Luc	人类
	CT26.WT-luc-mCh-puro	老鼠
	MC38-NCI.TD1-luc-mCh-puro	老鼠
子宫内膜	KLE-Luc-mCh-Puro	人类
白血病(AML)	Kasumi-3-Luc-mCh-Puro	人类
	KG-1-Luc-mCh-Puro	人类
	MV-4-11-Luc-mCh-Puro	人类
	C1498 Luc mCh Puro	老鼠
白血病	NALM6-Luc-MCh-Puro	人类
	盐土(pMMP-Luc-Neo)	人类
白血病(CML)	k - 562 luc2	人类
白血病(erythro)	冥界92.1.7-Luc-Neo	人类
	赫尔吕克尼奥酒店	人类
白血病[t]	DND-41-Luc-mCh-Puro	人类
	MOLT-4-Luc-MCh-Puro	人类
肝脏	BNL 1ME A.7R.1-Luc-mCh-Puro	老鼠
	消息灵通的- 55.1 - c - luc妇幼保健雪茄烟	老鼠
	Hepa 1-6-Luc-mCh-Puro	老鼠
肺	LL/2-Luc-M38	老鼠
	AB1-Luc-mCh-puro	老鼠
肺[非小细胞肺癌]	A549-Luc-C8	人类
	HCC827-Luc-mCh-Puro	人类
	NCI-H125-Luc	人类
	NCI-H1703-Luc-mCh-Puro	人类
	NCI-H1975-Luc	人类
	NCI-H460-Luc2	人类
	PC-9-Luc-mCh-puro	人类
淋巴瘤	EL4 Luc mCh Puro	老鼠
淋巴瘤[B细胞]	A20-Luc2-Puro	老鼠
淋巴瘤(伯基特)	Daudi-Luc-mCh-Puro	人类
	拉吉·吕克	人类
	Ramos-Luc	人类
淋巴瘤(扩散混合)	SU-DHL-6-Luc-mCh-Puro	人类
淋巴瘤(DLBCL)	OCI-Ly19-Luc-Neo	人类
	OCI-Ly3-Luc-mCh-Puro	人类
	OCI-Ly7-Luc-Neo	人类
	SU-DHL-4-Luc-mCh-Puro	人类
	托莱多卢克尼奥酒店	人类
	OCI-Ly1 R10-Luc-mCh-Puro	人类
	OCI-Ly1 R7 Luc mCh Puro	人类
乳房/乳房	MCF7 Luc mCh Puro	人类
	mda - mb - 231 - luc d3h1	人类
	E0771-Luc-mCh-Puro	老鼠
	mda - mb - 231 - luc d3h2ln	人类
	EMT6-Luc-mCh-Puro	老鼠
	MX-1-Luc	人类
	4T1-Luc2-1A4	老鼠
黑素瘤	OCM-1-Luc-mCh-Puro	人类
	SK-MEL-28-Luc-mCh-Puro	人类
	B16-F10-Luc-G5	老鼠
	B16-F10-Luc2	老鼠
	克劳德曼S91卢克麦克普罗酒店	老鼠
	YUMM1.7-Luc-mCh-Puro	老鼠
骨髓瘤	JJN-3-Luc-G418R	人类
	MM.1S（pMMP Luc Neo）	人类
	NCI-H929-Luc-mCh-Puro	人类
	5TGM1 Luc	老鼠
	J558 Luc mCh Puro	老鼠
卵巢	A2780-Luc	人类
	IGROV1-Luc-Mch-Puro	人类
	OVCAR-5-Luc-mCh-Puro	人类
	OVCAR-8-Luc-mCh-Puro	人类
	SK-OV-3-Luc-D3	人类
	ID8-Luc-mCh-Puro	老鼠
	国家卫生研究院:OVCAR-3-Luc-mCh-Puro	人类
胰腺的	BxPC-3-Luc2	人类
	MIA PaCa-2-Luc	人类
	PANC-1-Luc	人类
	Pan02。TD1-Luc-mCh-Puro	老鼠
前列腺癌	杜145 - luc	人类
	PC-3-Luc	人类
	PC-3M-Luc-C6	人类
肾的	293卢克麦克普罗	人类
	786 - o - luc neo(获救)	人类

表1:Luciferase-labeled细胞系

联系我们索取完整的数据集或了解更多关于我们的荧光素酶激活服务以及如何将其应用于您的临床前研究。yaboapp体育官网

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参考文献

^1.Jessamy C. Tiffen, Charles G. Bailey, Cynthia Ng, John E.J. Rasko & Jeff Holst。荧光素酶的表达和生物荧光不影响肿瘤细胞在体内和体外的生长。分子癌症2010;9: 299。

^2.Dan M. Close, Tingting Xu, Gary S. Sayler, Steven Ripp。活体生物发光成像(BLI):活体动物生物过程的无创可视化和审问。传感器(巴塞尔)2011;11(1): 180 - 206。注:请全部注意动物护理和使用在经过IACUC协议审查和批准的aaalac认可的设施中，根据动物福利法规进行。